北京2022年6月15日 /美通社/ -- 第27屆歐洲血液學(xué)年會(huì)（EHA）于2022年6月9日-17日以線上+線下的方式如期召開(kāi)，作為全球血液學(xué)領(lǐng)域規(guī)模最大的國(guó)際會(huì)議之一，每年來(lái)自100多個(gè)國(guó)家的上萬(wàn)余名血液領(lǐng)域?qū)I(yè)人士，分享和探討全球最前沿的研究進(jìn)展和突破性臨床研究成果。本屆EHA大會(huì)，陸道培醫(yī)學(xué)團(tuán)隊(duì)有5項(xiàng)研究成果（包括2篇口頭報(bào)告、3篇墻報(bào)展示）入選。
陸道培醫(yī)學(xué)團(tuán)隊(duì)作為國(guó)內(nèi)血液病領(lǐng)域的佼佼者，除了在ASH、EBMT、EHA等大會(huì)上強(qiáng)勢(shì)發(fā)聲，研究成果及論文更是刊登在Blood、American Journal of Hematology等血液領(lǐng)域權(quán)威期刊上，展示出了團(tuán)隊(duì)卓越的醫(yī)療技術(shù)水平以及強(qiáng)大的科研創(chuàng)新能力。
陸道培醫(yī)院醫(yī)療執(zhí)行院長(zhǎng)陸佩華教授通訊作者，血液科楊君芳主任為第一作者，摘要號(hào)：S110，題為：A novel and successful CD7 gene knockout CAR-T cell therapy for relapsed or refractory T-cell hematologic malignancies（一種新型基因敲除的CD7 CAR-T細(xì)胞治療復(fù)發(fā)或難治性T細(xì)胞血液腫瘤的研究）的研究成果入選本屆EHA大會(huì)口頭報(bào)告。
陸佩華院長(zhǎng)的口頭報(bào)告引起熱烈反響，與會(huì)學(xué)者紛紛發(fā)言熱情討論，并表示該項(xiàng)研究成果對(duì)于T細(xì)胞惡性腫瘤患者的治療是一個(gè)較大的突破，報(bào)告中的數(shù)據(jù)與結(jié)論鼓舞人心。會(huì)議結(jié)束后，陸佩華院長(zhǎng)收到了很多來(lái)自國(guó)外同仁的郵件咨詢，我們也期待今后給國(guó)內(nèi)外血液領(lǐng)域同仁帶來(lái)更進(jìn)一步的研究成果。
研究背景
T細(xì)胞惡性腫瘤是一種復(fù)發(fā)率和死亡率較高的血液腫瘤。由于CAR-T細(xì)胞和惡性T細(xì)胞共同表達(dá)CD7會(huì)導(dǎo)致CAR-T細(xì)胞的"自相殘殺"，因此這在一定程度上限制了CAR-T細(xì)胞治療在T細(xì)胞惡性腫瘤中的發(fā)展。在這里，我們通過(guò)CRISPR/CAS9基因編輯開(kāi)發(fā)了一種不會(huì)產(chǎn)生"自相殘殺"的KO7CAR-T細(xì)胞。
研究目標(biāo)
在一期臨床試驗(yàn)中，我們探索了KO7CAR-T細(xì)胞治療復(fù)發(fā)或難治性(R/R) T細(xì)胞惡性腫瘤(NCT04916860和NCT04938115)的有效性和安全性。
研究方法
通過(guò)單采收集患者(n=13)和移植供者(n=2)的外周血單個(gè)核細(xì)胞。在轉(zhuǎn)染CD7CAR的前24小時(shí)，通過(guò)CD7靶向的Cas9-gRNA RNP電穿孔T細(xì)胞，最終獲得敲除CD7的CAR-T細(xì)胞。KO7CAR-T是靶向CD7的第二代CAR-T，共刺激因子是4-1BB和CD3ζ。在輸注KO7CAR-T細(xì)胞之前的第5天至第3天，所有患者都進(jìn)行了預(yù)處理，靜脈注射氟達(dá)拉濱(30mg/m2/d)和環(huán)磷酰胺(300mg/m2/d)。
研究結(jié)果
從2020年10月到2021年10月，共有15例急性T淋巴細(xì)胞白血病(n=10)、T細(xì)胞淋巴母細(xì)胞淋巴瘤(n=3)和混合表型急性白血病(n=2)患者入組并接受了KO7 CAR-T細(xì)胞治療。入組患者的中位年齡為28(8-46)歲。4例患者曾接受過(guò)造血干細(xì)胞移植。入組時(shí)，10例患者的骨髓形態(tài)值大于5%, 9例患者有髓外病灶(EMD，其中7例是彌漫性累及，2例是大體積縱隔腫塊)。所有患者的KO7 CAR-T細(xì)胞均成功制備，轉(zhuǎn)染率的中位值為59.0%(22.5%-97.4%)?；剌攩蝿┝康腒O7CAR-T細(xì)胞，分為三個(gè)劑量，低劑量(1.5~5x105cells/kg, n=8)，中劑量(1x106cells/kg, n=6)或高劑量(2x106cells/kg, n=1)。
在KO7 CAR-T回輸后第28天的療效評(píng)估中，15/15例(100%)患者都達(dá)到了最小殘留病(MRD)陰性的完全緩解(CR)。對(duì)于9例有EMD的患者，在回輸后第30天的髓外評(píng)估中，6例患者達(dá)到CR, 2例患者達(dá)到部分緩解(PR)， 另外1例屬于二次移植后復(fù)發(fā)，在第35天的髓外評(píng)估中沒(méi)有緩解，然后出組。研究的截止時(shí)間是2022年2月10日，中位隨訪時(shí)間為309天(35~407天)。KO7 CAR-T細(xì)胞回輸后2個(gè)月左右，12例患者橋接了異基因造血干細(xì)胞移植，除了1例患者第217天復(fù)發(fā)后在第249天死于腦出血外以外，剩下的11例患者仍然處于緩解狀態(tài)，移植后持續(xù)緩解的中位時(shí)間為253(30~388)天。2例在KO7 CAR-T回輸后沒(méi)有橋接移植的患者（在CAR-T治療之前曾接受過(guò)移植)，分別在KO7 CAR-T回輸后的第78天和第103天死于感染和GVHD。
KO7 CAR-T回輸后，所有的患者都發(fā)生了細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS），10/15例(66.7%)患者發(fā)生輕度CRS（小于等于II級(jí)），5/15例(33.3%)患者發(fā)生III級(jí)CRS。3例患者發(fā)生神經(jīng)毒性，其中1例為I級(jí)神經(jīng)毒性，2例為III/IV級(jí)神經(jīng)毒性，在使用皮質(zhì)激素和/或托珠單抗后均得到控制。
KO7 CAR-T回輸后，通過(guò)q-PCR和流式細(xì)胞儀來(lái)檢測(cè)CAR-T細(xì)胞的擴(kuò)增情況，q-PCR檢測(cè)到的KO7 CAR-T細(xì)胞基因組DNA的中位峰值為1.77×105 (0.279~14.3×105)copies/μg，發(fā)生在第20天(10~25天)；流式檢測(cè)到的中位KO7 CAR-T細(xì)胞擴(kuò)增的中位峰值為63.47%(23.1%~94.18%)，發(fā)生在第15天(9~25天)。
結(jié)論
這項(xiàng)研究表明，KO7CAR-T細(xì)胞療法對(duì)CD7陽(yáng)性T細(xì)胞惡性腫瘤有很好的療效，甚至對(duì)那些移植后復(fù)發(fā)的患者也呈現(xiàn)了較好療效。而且，KO7CAR-T細(xì)胞療法的安全性是可控的，但是我們還需要更多患者的數(shù)據(jù)和更長(zhǎng)的觀察時(shí)間，來(lái)進(jìn)一步評(píng)估KO7CAR-T細(xì)胞的療效。
